DETECÇÃO FENOTÍPICA DOS PRINCIPAIS MECANISMOS DE RESISTÊNCIA AOS MACROLÍDEOS EM Staphylococcus spp.

HIPEREXPRESSÃO DE BOMBAS DE EFLUXO

DEFINIÇÃO

São codificadas pela presença de um gene denominado msrA, que induz a síntese de bombas de efluxo que utilizam os Macrolídeos como substrato preferencial, gerando uma concentração subterapêutica da droga no interior do microrganismo, tornando desta forma a bactéria resistente a sua ação.

CLASSIFICAÇÃO

• São bombas de efluxo;

ANTIMICROBIANOS AFETADOS

• Eritromicina;
• Claritromicina;
• Azitromicina.

FORMA DE DISSEMINAÇÃO

• Plasmidiais;
• Cromossômicas (SCCmec --> transposição)

ANTIMICROBIANOS UTILIZADOS NA DETECÇÃO

• Eritromicina;
• Clindamicina

COMO DETECTAR FENOTIPICAMENTE

• Através do D-Teste

D-TESTE

• Preparar uma suspensão da cultura pura de Staphylococcus spp. equivalente a escala 0,5 MacFarland e semear em uma placa de ágar Mueller Hinton;
• Colocar o disco de Eritromicina e 20 mm centro a centro deste, o disco de Clindamicina;
• Incubar por 18-24 horas e realizar a leitura do halo de inibição.
• POSITIVO: De acordo com a tabela 1.
• NEGATIVO: De acordo com a tabela 1.

TABELA 1: CRITÉRIOS DE INTERPRETAÇÃO DO D-TESTE

MECANISMO	GENE	FENÓTIPO	ERI	CLI	TESTE DE INDUÇÃO	COMO REPORTAR
ALTERAÇÃO RIBOSSÔMICA	erm	MLSi	R	S	+	ERI - R CLI - R
	erm	MLSc	R	R	-	ERI - R CLI - R
EFLUXO	msrA	-	R	S	-	ERI - R CLI - S

 ERI = ERITROMICINA

CLI = CLINDAMICINA

EXEMPLO DE DETECÇÃO

Imagem 1: Staphylococcus aureus com expressão fenotípica do
gene msrA. Note a resistência a Eritromicina e a sensibilidade a
Clindamicina (discos no centro da placa). Esta cepa apresenta a
expressão de bombas de efluxo. A cepa acima é um MRSA.

Imagem 2: Detalhe do D-teste. Note a resistência a Eritromicina
e a sensibilidade a Clindamicina (expressão fenotípica do gene
msrA).