terça-feira, 3 de outubro de 2017

DETECÇÃO FENOTÍPICA DOS PRINCIPAIS MECANISMOS DE RESISTÊNCIA AS LINCOSAMIDAS

METILAÇÃO NA PORÇÃO 23S DO rRNA (GENE erm)

DEFINIÇÃO

O gene erm induz a modificação do ribossomo bacteriano (metilação na porção 23S do rRNA), tornando desta forma o microrganismo resistente aos Macrolídeos e Lincosamidas.

CLASSIFICAÇÃO

Modificação no sítio alvo de ação do antimicrobiano.

ANTIMICROBIANOS AFETADOS

Eritromicina;
Claritromicina;
Azitromicina;
Lincomicina;
Clindamicina.

FORMAS DE DISSEMINAÇÃO

Plasmideais;
Cromossômicas (SCCmec --> transposição).

ANTIMICROBIANOS UTILIZADOS NA DETECÇÃO

Eritromicina;
Clindamicina.

COMO DETECTAR FENOTIPICAMENTE

Através do D-Teste.

D-TESTE
  • Preparar uma suspensão da cultura pura do microrganismo a ser testado (ex: Staphylococcus aureus) equivalente a escala 0,5 MacFarland e semear em uma placa de Ágar Mueller Hinton;
  • Colocar o disco de Eritromicina e 20 mm centro a centro deste, o disco de Clindamicina;
  • Incubar por 18-24 horas e realizar a leitura do halo de inibição;
  • Positivo: De acordo com a tabela 1;
  • Negativo: De acordo com a tabela 1.

TABELA 1: Critérios de interpretação do D-teste

MECANISMO
GENE
ENZIMA
ERI
CLI
TESTE DE INDUÇÃO
COMO REPORTAR
ALTERAÇÃO RIBOSSÔMICA
erm
MLSi
R
S
+
ERI – R
CLI – R
erm
MLSC
R
R
-
ERI – R
CLI – R
EFLUXO
msrA
-
R
S
-
ERI – R
CLI – S
ERI = Eritromicina; CLI = Clindamicina

EXEMPLO DE DETECÇÃO

Imagem 1: Detecção fenotípica do gene msrA (bomba de efluxo).
Note a resistência a Eritromicina e a sensibilidade a Clindamicina,
sem achatamento do halo de inibição da Clindamicina. Esta cepa
é portanto sensível a Clindamicina e resistente a Eritromicina.
Microrganismo: Staphylococcus aureus


















Imagem 2: Detecção fenotípica do gene erm (metilação
na porção 23S do rRNA). Note a resistência a Eritromicina
e sensibilidade a Clindamicina, com achatamento do halo de
inibição da Clindamicina (fenótipo MLSi). Esta cepa é portanto
resistente a Eritromicina e a Clindamicina.
Microrganismo: Staphylococcus aureus


















Imagem 3: Detecção fenotípica do gene erm (metilação
na porção 23S do rRNA). Note a resistência a Eritromicina
e resistência a Clindamicina, (fenótipo MLSc). Esta cepa é portanto 
resistente a Eritromicina e a Clindamicina.
Microrganismo: Staphylococcus epidermidis















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